Šta je bakteriološka laboratorija? Mikrobiologija sa mikrobiološkom tehnologijom istraživanja - bakteriološka laboratorija, njena struktura i namena

obavljanje poslova sa mikroorganizmima III - IV grupe patogenosti

Tabela 1

1	2	3
1.		najmanje 12
2.	Setva
3.	Prostorija za istraživanje crijevnih infekcija	6 na 1 radno mjesto, ali ne manje od 12
4.	Soba za fagotipizaciju	najmanje 12
5.	Prostorije za sprovođenje istraživanja iz sanitarne bakteriologije:
1)	za doktore	6 po 1 radnom mestu, ali ne manje od 12
2)	za laboratorijske tehničare	6 po 1 radnom mestu, ali ne manje od 12
3)	kutija sa preboksom	najmanje 12
6.	Prostorija za testiranje na kapljične infekcije:
1)	za doktore	6 po 1 radnom mestu, ali ne manje od 12
2)	za laboratorijske tehničare	6 po 1 radnom mestu, ali ne manje od 12
3)	kutija sa preboksom	najmanje 12
4)	soba za serološke studije	najmanje 14
5)	kutija sa pre-boksom za testiranje sterilnosti	najmanje 12
6)	pranje	najmanje 18
7)	pripremni	6 po 1 radnom mestu, ali ne manje od 10
8)	sterilizacija	najmanje 15 za 2 ormarića za sterilizaciju, za svaki dodatni ormarić najmanje 5
7.	Termalne sobe:
1)	za istraživanje na crijevne infekcije	najmanje 6
2)	za istraživanja u sanitarnoj bakteriologiji	najmanje 6
3)	With temperaturni uslovi plus 43 0 C	najmanje 6
8.	rashladna komora	najmanje 6
9.	Autoklav za dezinfekciju korišćenog infektivnog materijala i sterilizaciju medija i pribora	najmanje 10 po 1 autoklavu, Za svaki dodatni najmanje 5
10.	Pripremne sobe hranljive podloge:
1)	srednje kuvanje	najmanje 12
2)	kutija sa pre-boksom za punjenje medija	najmanje 10
11.	Ostave:
1)	sterilno laboratorijsko stakleno posuđe	najmanje 12
2)	nesterilno laboratorijsko stakleno posuđe	najmanje 12
12.	Sanitarna propusnica za osoblje:
1)	ormar za gornju odjeću	0,4 po kabinetu, ali ne manje od 6
2)	tuš sa 1 paravan	najmanje 1
3)		0,4 po kabinetu, ali ne manje od 6
4)	wc za 1 wc	ne manje od 0,85
13.	Soba za osoblje	najmanje 8
14.	Registracija i izdavanje rezultata ispitivanja	najmanje 6
1)	soba za uzorkovanje	najmanje 6
15.	WC za 1 wc	ne manje od 0,85
16.	Radna soba	4 po 1 mjestu, ali ne manje od 30

Napomena: u laboratorijama sa malim obimom posla, skup prostorija zavisi od opsega izvedenih studija. Dozvoljeno je postavljanje u jednoj prostoriji: prostorije za pripremu i sterilizaciju (18 m2), sanitarne bakteriološke kutije i boksove za kapljične infekcije (6 m2).

^ Skup prostorija i prostora bakteriološke laboratorije koja radi s mikroorganizmima I-II grupe patogenost

tabela 2

1	2	3
1.	Čisti prostor pruža:
1)	ormar za gornju odjeću	0,4 po kabinetu, ali ne manje od 6
2)	ormar za specijalnu odjeću	0,4 po kabinetu, ali ne manje od 6
3)	kabinet šefa laboratorije	najmanje 12
4)	prostorije za administrativne poslove	najmanje 12
2.	Uslovno čista zona omogućava:
1)	prostorija sa kutijom za pripremu i doziranje hranjivih podloga	najmanje 12
2)	autoklav za 1 autoklav	najmanje 10 za svaku Dodatno – najmanje 5
3)	pripremno-sterilizaciona soba	najmanje 18
4)	pranje	najmanje 18
5)	ostava	najmanje 12
6)	wc za 1 wc	ne manje od 0,85
3.	U zaraznoj zoni obezbeđeno je:
1)	5-6 kutija sa preboksovima	najmanje 9 Najmanje 3
2)	prostorija za ekspresnu dijagnostiku	najmanje 12
3)	autoklav za 1 autoklav	najmanje 10 za svaku Napomena: prostorije uslovno čiste zone su odvojene od prostorija čiste zone sanitarnim prolazom. ^ Skup prostorija i prostora virološka laboratorija Tabela 3 1 2 3 1. Ured šefa laboratorije najmanje 12 2. Sredstva za identifikaciju respiratornih virusa: 1) kutija sa preboksom za inficiranje kulture tkiva i embriona najmanje 12 2) luminescentna najmanje 10 3. Sredstva za identifikaciju enterovirusa: 1) kutija sa preboksom za infekciju kulturom tkiva najmanje 12 2) kutija sa preboksom za rad sa referentnim sojevima najmanje 12 3) kutija sa preboksom za sanitarnu virologiju najmanje 12 4. Prostorija za pripremu kulture tkiva: 1) kutija sa preboksom najmanje 12 5. Soba za enzimski imunotest: 1) kutija sa preboksom najmanje 12 6. Prostorije za testiranje polimeraze lančana reakcija: 1) područje za pripremu uzorka najmanje 12 2) područje pripreme reakcione smjese najmanje 10 3) zona pojačanja i detekcije najmanje 10 7. Autoklav za 2 autoklava najmanje 15 8. Pranje najmanje 12 9. Soba za pripremu-sterilizaciju najmanje 6 10. Ostava za posuđe, reagense, materijal najmanje 6 11. Prostorija za registraciju, prijem, sortiranje i dostavu rezultata ispitivanja najmanje 8 12. Soba za osoblje najmanje 8 13. Sanitarna propusnica za osoblje: 1) ormar za gornju odjeću 0,4 po kabinetu, ali ne manje od 6 2) tuš sa 1 paravan najmanje 1 3) ormar za specijalnu odjeću 0,4 po kabinetu, ali ne manje od 6 14. WC za 1 wc ne manje od 0,85 Napomena: rad na inficiranju kulture tkiva, izvođenje istraživanja iz sanitarne virologije i rad sa referentnim sojevima mogu se obavljati u istoj kutiji sa predboksom pri ugradnji zasebnih bioloških sigurnosnih kutija. Tabela 4 br. Naziv prostorija Površina, m2 1 2 3 1. Prostorija za prijem, registraciju i izdavanje rezultata testiranja 6 po 1 radnom mestu, ali ne manje od 12 2. Prostorija za helmintološka istraživanja 9 po 1 radnom mjestu, ali ne manje od 12 3. Soba za serološka istraživanja najmanje 12 4. Prostorija za ekspresnu dijagnostiku najmanje 12 5. Pranje najmanje 9 6. Ormar za specijalnu odjeću 0,4 po kabinetu, ali ne manje od 6 7. Soba za osoblje najmanje 12 8. Entomološka istraživačka soba najmanje 12 9. Ostava najmanje 6 10. Ormar za gornju odjeću 0,4 po kabinetu, ali ne manje od 6 11. WC za 1 wc ne manje od 0,85 ^ Komplet prostorija i prostora sanitarno-hemijske laboratorije i laboratorije za određivanje rezidua pesticida i nitrata Tabela 5 br. Naziv prostorija Površina, m2 1 2 3 1. Analitička sala za higijenu rada najmanje 18 2. Analitička sala za higijenu hrane najmanje 18 3. Analitička soba komunalne higijene najmanje 18 4. Analitička prostorija za određivanje pesticida i nitrata najmanje 18 5. Kromatografski najmanje 6 po hromatografu 6. Atomska apsorpcija najmanje 10 7. Prostorija za pripremu uzoraka i pepelovanje najmanje 15 8. Težina najmanje 4 do 1 skale, ali ne manje od 6 9. Prostorija za pranje-destilaciju najmanje 10 10. Ured šefa laboratorije najmanje 12 11. najmanje 4 per jedan covek 12. Prostorije za skladištenje reagensa najmanje 10 13. Soba za registraciju, prijem uzoraka i izdavanje rezultata najmanje 6 14. WC za 1 wc ne manje od 0,85 ^ Komplet prostorija i prostorija toksikološke laboratorije polimera i drugih hemikalija Tabela 6 1 2 3 1. Kancelarija menadžera najmanje 12 2. Kancelarije za specijaliste najmanje 4 per jedan covek 3. Sjeme - inhalacija najmanje 12 4. Prostorija za patomorfološke i biohemijske studije najmanje 18 5. Prostorija za funkcionalne (toksikološke) studije najmanje 18 6. Prostorija za sanitarna i hemijska istraživanja najmanje 18 7. Materijal (soba za pripremu uzoraka) najmanje 6 8. Pranje najmanje 12 9. Težina najmanje 4 do 1 skale, ali ne manje od 6 ^ Komplet prostorija i prostora elektromagnetne laboratorije polja i drugi fizički faktori Tabela 7 br. Naziv prostorija Površina, m2 1 2 3 1. Kancelarija menadžera najmanje 12 2. Kancelarije za specijaliste najmanje 4 per jedan covek 3. Prostorija za skladištenje opreme za zvučne vibracije najmanje 10 4. Prostorija za skladištenje, pripremu, popravku i postavljanje opreme za merenje elektromagnetnih polja najmanje 10 5. Tuš sa 1 paravan najmanje 1 6. WC za 1 wc ne manje od 0,85 7. Ormar za gornju odjeću najmanje 4 ^ Skup prostorija i prostora radiološka laboratorija Tabela8 1 2 3 1. Kancelarija menadžera najmanje 12 2. Kancelarije za specijaliste najmanje 4 per jedan covek 3. Prostorija za prijem i početnu obradu uzoraka najmanje 16 4. Prostorija za skladištenje i pepeljenje uzoraka najmanje 18 5. Radiohemijska (čista zona) 6. Radiohemijska (prljava zona) ne manje od 20, ali ne manje od 10 po radnom mjestu 7. Radiometrijski najmanje 20 8. Spektrometrijski najmanje 18 9. Ostava za prijenosnu opremu najmanje 8 10. Prostorija za dekontaminaciju posuđa, kontejnera, opreme, posteljine i specijalne odjeće najmanje 20 11. Ormar za gornju odjeću najmanje 4 12. Tuš sa 1 paravan najmanje 1 13. WC za 1 wc ne manje od 0,85 _____________________________ Dodatak 2 U laboratorije" Zahtjevi za korištenje zaštitnog odijela 1. U zavisnosti od prirode obavljenog posla koriste se sledeće vrste zaštitnih odela: 1) tip 1 – pidžama ili kombinezon, medicinske papuče, medicinska kapa, velika marama (kapuljača), ogrtač protiv kuge, kapuljača pozitivan pritisak, pamučno-gazna maska ​​(respirator za prašinu, gas maska ​​za filtriranje ili izolaciju kisika), naočale, gumene rukavice, ručnik, čarape, papuče, gumene čizme; 2) 2 vrste - pidžama ili kombinezon, medicinske papuče, medicinska kapa, velika marama (kapuljača), ogrtač protiv kuge, maska ​​od pamučne gaze, gumene rukavice, peškir, čarape, papuče, gumene čizme; 3) 3 vrste - pidžama, medicinska kapa, veliki šal, ogrtač protiv kuge, gumene rukavice, peškir, čarape, papuče, galoše; 4) 4 vrste - pidžama, kapa (mala marama), haljina protiv kuge (hirurška), čarape, papuče. 2. Kombinezoni i pidžame moraju biti izrađeni od debele tkanine (kaliko ili lan), sa kopčanjem na slijepo dugme na prednjoj strani. 3. Haljina protiv kuge šije se kao hirurška, ali mnogo duža (do donje trećine noge), a podovi treba da se duboko preklapaju; pojas i kravate na kragni treba da se sastoje od dva dijela, svaki zašiven na posebnom polju za vezanje rukava, prišivena je jedna duga traka. 4. Izrađuje se šal protiv kuge dimenzija 90x90x125 cm. 5. Pamučno-gazna maska ​​se pravi od komada gaze dužine 125 cm i širine 50 cm. Komad gaze se iseče po dužini od 50 cm sa obe strane po sredini sa spoljnih krajeva, zatim kontinuirano, ravnomerno. sloj vate dužine 25 cm stavlja se u srednji dio gaze u uzdužnom smjeru, širine 17 cm. 6. Naočare se koriste za naočare za letenje sa širokim, čvrsto pripijenim rubom, zakrivljenim staklima ili bilo kojim drugim dizajnom koji osigurava njihovu nepropusnost. 7. Prije ulaska u prostoriju u kojoj rade sa infektivnim materijalom oblači se odijelo protiv kuge u sljedećem redoslijedu: pidžama (kombinezon), čarape, papuče, medicinska kapa, kapuljača (velika marama), ogrtač protiv kuge i čizme. Trake na kragni ogrtača i pojasu ogrtača se sprijeda s lijeve strane vežu omčom, nakon čega se trake pričvršćuju za rukave. Respirator (maska) treba da pokrije usta i nos, gornje trake maske se vežu u petlju na potiljku, donje na tjemenu, a na bočne strane krila se stavljaju pamučni štapići. nos. Naočare moraju dobro pristajati i biti provjerene na filtraciju zraka. 8. Za dezinfekciju odijela predviđene su posebne posude sa dezinfekcijskim rastvorom za tretiranje: čizme ili galoše, ruke u rukavicama prilikom skidanja odijela, maske od pamučne gaze, ogrtač, marama (kapuljača), ručnici, rukavice. Čaše su uronjene u alkohol od 70°. 9. Prilikom dezinfekcije autoklavom, ključanjem ili u komori za dezinfekciju, odijelo se preklapa u kante ili duple vreće. 10. Odijelo se skida sljedećim redoslijedom, potapanjem ruku u rukavicama u dezinfekcijski rastvor nakon skidanja svakog dijela odijela: 1) čizme ili galoše se brišu od vrha do dna tamponima obilno navlaženim dezinfekcijskim rastvorom, a ručnik se uklanja; 2) obrišite pamučnim štapićem natopljenim dezinfekcionim rastvorom, skinite kecelju, ako postoji u odelu, preklopite je spoljnom stranom prema unutra; 3) skine rukave i drugi par rukavica, ako su bile neophodne tokom rada; 4) skinuti naočare povlačeći ih napred, gore i nazad iza glave sa obe ruke; 5) pamučno-gazna maska ​​se odveže i skine bez dodirivanja lica spoljnom stranom; 6) odvezati kravate kragne ogrtača, pojasa i donjeg dijela gornja ivica rukavice, odvežite kravate na rukavima, skinite ogrtač, okrećući vanjski dio prema unutra; 7) skinite maramu, pažljivo skupljajući sve njene krajeve u jednoj ruci na potiljku; 8) skinuti rukavice (ako postoji sumnja da je narušen integritet rukavica, proveravaju se u rastvoru za dezinfekciju (ali ne sa vazduhom); 9) izuvanje čizama; 10) nakon skidanja zaštitnog odijela, ruke se tretiraju 70° alkoholom, a zatim se dobro operu sapunom. _________________________ Dodatak 3 TO Sanitarna pravila„Sanitarno Epidemiološki zahtjevi U laboratorije" ^ Ministarstvo zdravlja Republike Kazahstan DOZVOLA Izdaje se laboratoriji_______________________________________________________________ (ime kompanije) Iznijeti napolje ______________________________________________________________ (vrste radova: dijagnostički, eksperimentalni, proizvodni) Sa mikroorganizmima__________________________ grupe patogenosti, uključujući (naziv mikroorganizama) __________________________________________________________________ Na osnovu: _______________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ "____"______________20____ Vrijedi ___________________________________ godina (godina) od datuma izdavanja Predsjedavajući Režimska komisija _________________________ Dodatak 4 Sanitarnim pravilima „Sanitarno- Epidemiološki zahtjevi U laboratorije" ^ Klasifikacija mikroorganizama I-IV grupe patogenosti

TEMA LEKCIJE: Bakteriološka laboratorija i pravila rada u njoj. Klasifikacija mikroorganizama. Morfologija bakterija. Metode za određivanje vrste mikroba. Bakterioskopska metoda. Tehnika mikroskopije sa imersionim sistemom.

CILJ ČASA: Upoznajte se sa strukturom bakteriološke laboratorije i pravilima rada u njoj. Upoznajte se sa principima klasifikacije mikroorganizama. Proučiti morfološke karakteristike bakterija i metode za određivanje vrste mikroba. Ovladati bakterioskopskom metodom pregleda i mikroskopskim tehnikama sa imerzionim sistemom.

CILJEVI ČASA:

1. Upoznajte se sa strukturom bakteriološke laboratorije i pravilima rada u njoj.

2. Upoznati se sa principima klasifikacije mikroorganizama.

3. Proučiti morfološke karakteristike bakterija i metode za određivanje vrste mikroba.

4. Savladati tehniku ​​mikroskopije sa imersion sistemom.

Izgradnja bakteriološke laboratorije

Bakteriološka laboratorija je namijenjena za proučavanje materijala koji sadrže uzročnike bakterijskih infekcija, određivanje sanitarnih i mikrobioloških pokazatelja, praćenje stanja i jačine specifičnog imuniteta i dr. mikrobiološka istraživanja. Bakteriološka laboratorija treba biti smještena u prostorijama izolovanim od drugih laboratorija sa potrebnom opremom i namještajem. Laboratorija mora imati poseban ulaz, ormar i tuš. Bakteriološka laboratorija treba da ima sledeće prostorije:

Prostorija za prijem i registraciju materijala;

Prostorije u kutijama za mikrobiološka istraživanja;

Autoklav;

Pranje;

Vivarijum.

Prostorije za mikrobiološka istraživanja opremljene su termostatima, frižiderima, centrifugama, vagama, vodenim kupatilima i elektromagnetnim mešalicama. Potrebna oprema je postavljena na stolove. Rad sa zaraženim materijalom se obavlja u boks With preboxer. Na ulazu u kutiju treba da stoji prostirka natopljena dezinfekcionim rastvorom. U kutiji se sortiraju primljeni uzorci, pripremaju i snimaju razmazi otiska prsta, a mikroorganizmi se inokuliraju na hranljive podloge. Stoga se u kutiji nalaze stolovi na kojima se postavlja alat potreban za rad: posude sa dezinfekcijskim rastvorima za korišćeno stakleno posuđe, stalci za epruvete, epruvete i Petrijeve posude sa hranljivim podlogama, sterilne pipete, malteri itd. -kutija u kanti, potrebno je imati sterilne mantile, kape, maske, a takođe iu predboksu treba da budu cipele koje se skidaju. Preboks može da primi termostate, frižidere, centrifuge i drugu opremu. U boksovima i pred-bokserskim prostorima svakodnevno se obavljaju mokro čišćenje, dezinfekcija i zračenje baktericidnim lampama 30-40 minuta prije početka rada i nakon rada.

IN autoklav potrebno je imati dva autoklava: jedan autoklav za čiste materijale (za sterilizaciju posuđa, podloga, instrumenata); drugi autoklav za zaražene materijale (za neutralizaciju inficiranih instrumenata i materijala).

Pranje dizajniran za pranje posuđa. Posuđe, pipete i instrumenti kontaminirani inficiranim materijalom se peru tek nakon sterilizacije. U njoj se nalaze ormarići za sušenje.

Vivarijum zove se prostorija koja se koristi za držanje laboratorijskih životinja. Vivarijum mora imati karantenski odjel, prostorije za ogledne i zdrave životinje, prostorije za pranje i dezinfekciju kaveza, opremu i zaštitnu odjeću, kuhinju za pripremu hrane, ostavu, prostoriju za stočnu hranu i spalionicu. Sve prostorije vivarijuma moraju biti izolovane jedna od druge.

Uvod

Kao i opći dio svake druge nauke, opća bakteriologija se bavi nespecifičnim pitanjima (recimo, identifikacijom pojedinačne vrste bakterije), ali problemi općenito; njegova metodologija pokriva osnovne procedure koje pronalaze široka primena u širokom spektru laboratorijska istraživanja. Ovo nastavno sredstvo nije usmjereno na identifikaciju bilo koje grupe mikroorganizama. To je zadatak sljedećih publikacija - o privatnoj i sanitarnoj mikrobiologiji. Međutim, metode predstavljene ovdje mogu biti korisne u bilo kojem polju gdje su bakterije uključene i mogu se primijeniti na praktične probleme koji uključuju izolaciju i tipizaciju bakterija.

Bakteriologija je postala nauka tek nakon razvoja jedinstvene metode, kroz koje nastavlja da utiče i prodire u kasnija nova područja nauke kao što su virologija, imunologija i molekularna biologija. Tehnika upotrebe čistih kultura koju je razvio R. Koch i imunološke reakcije i hemijske analize koje je prvi koristio L. Pasteur nisu izgubile na značaju.

Metodologija opće bakteriologije je prikazana u ovoj publikaciji koristeći strukturu koja je tipična za standard nastavna sredstva u ovoj disciplini. Međutim, za razliku od laboratorijskih radionica na predmetu mikrobiologije za univerzitete, on je detaljnije predstavljen u nekim odjeljcima i služi samo kao referenca. Ova struktura uzima u obzir specifičnu obuku i specijalizaciju bakteriologa i veterinarskih stručnjaka. Često se gradivo predstavlja proizvoljno, pa se neke metode spominju više puta, zbog želje da se pokaže njihova međusobna povezanost.

Bakteriološka laboratorija

Bakteriološke laboratorije kao strukturne jedinice organizovani su u sklopu regionalnih, okružnih, međuokružnih veterinarskih laboratorija, kao iu strukturi zonskih veterinarskih laboratorija. Organizuju se i u sanitarno-epidemiološkim nadzornim centrima, u infektivnim bolnicama, opštim bolnicama, nekim specijalizovanim bolnicama (npr. za tuberkulozu, reumatologiju, dermatovenerologiju) i u poliklinikama. Bakteriološke laboratorije su dio specijalizovanih istraživačkih institucija. Bakteriološke laboratorije se stalno koriste za potvrđivanje ili utvrđivanje procene podobnosti mesa za ishranu prema VSE.

Objekti istraživanja u bakteriološkim laboratorijama su:

1. Iscjedak iz organizma: urin, izmet, sputum, gnoj, kao i krv, patološki i kadaverični materijal.

2. Objekti spoljašnje okruženje: voda, vazduh, tlo, ispiranja iz opreme, hrana za životinje, tehnološke sirovine dobijene klanjem domaćih životinja.

3. Prehrambeni proizvodi, uzorci mesa i mesnih prerađevina, mlijeko i mliječni proizvodi za koje je potrebno ocijeniti prikladnost za prehrambene svrhe.

Prostorije bakteriološke laboratorije i oprema radnog mjesta

Specifičnosti mikrobiološkog rada zahtijevaju da prostorija namijenjena laboratoriji bude izolirana od dnevnih soba, prehrambenih jedinica i drugih neosnovnih proizvodnih prostorija.

Bakteriološka laboratorija obuhvata: laboratorijske prostorije za bakteriološka istraživanja i pomoćne prostorije; autoklav ili sterilizacija za dezinfekciju otpadnog materijala i kontaminiranog pribora; praonica opremljena za pranje suđa; bakteriološka kuhinja – za pripremu, flaširanje, sterilizaciju i čuvanje hranljivih podloga; vivarij za držanje pokusnih životinja; materijal za skladištenje rezervnih reagensa, posuđa, opreme i kućne opreme.

Navedene pomoćne prostorije, kao samostalne strukturne cjeline, dio su velikih bakterioloških laboratorija. U malim laboratorijama, bakteriološka kuhinja i kuhinja za sterilizaciju su kombinovane u jednoj prostoriji; Ne postoji posebna prostorija za držanje pokusnih životinja.

Prostorije mikrobioloških laboratorija podijeljene su u 2 zone prema stepenu opasnosti za osoblje:

I. “Infektivna” zona - prostorija ili grupa laboratorijskih prostorija u kojima se manipuliše i čuva osoblje u odgovarajućoj vrsti zaštitne odjeće;

II. "Čista" zona - prostorije u kojima se ne obavljaju radovi biološki materijal, osoblje je obučeno u ličnu odjeću.

Ispod laboratorijskih prostorija u kojima se sve proizvodi bakteriološko istraživanje, dodijelite najsvjetlije, najprostranije sobe. Zidovi u ovim prostorijama, na visini od 170 cm od poda, ofarbani su u svijetle boje uljanom bojom ili obloženi pločicama. Pod je obložen relinom ili linoleumom. Ova vrsta završne obrade omogućava vam korištenje dezinfekcijskih otopina prilikom čišćenja prostorije.

Svaka prostorija treba da ima umivaonik sa tekućom vodom i policu za flašu dezinfekcionog rastvora.

Jedna od prostorija je opremljena staklenom kutijom - izolovanom prostorijom sa predprostorom (preboksom) za obavljanje radova u aseptičnim uslovima. U kutiju se postavlja sto za setvu i stolica, a iznad radnog mesta montirane su baktericidne lampe. U pretprostoru je postavljen ormar za čuvanje sterilnog materijala. Prozori i vrata prostorija u "zaraznoj" zoni moraju biti zapečaćeni. Postojeća izduvna ventilacija iz "zarazne" zone mora biti izolirana od drugih ventilacijskih sistema i opremljena filterima fino čišćenje zrak.

Laboratorijska prostorija je opremljena laboratorijskim stolovima, ormarićima i policama za odlaganje opreme, pribora, boja i reagensa neophodnih za rad.

Veoma veliki značaj ima za posao pravilnu organizaciju radno mjesto bakteriologa i laboratorijskog asistenta. Laboratorijski stolovi su postavljeni u blizini prozora. Kada ih postavljate, treba nastojati da svjetlo pada ispred ili sa strane osobe koja radi, po mogućnosti s lijeve strane, ali ni u kojem slučaju s leđa. Preporučljivo je da prostorije za analizu, posebno za mikroskopiju, imaju prozore orijentisane na sjever ili sjeverozapad, jer je za rad potrebno ravnomjerno, difuzno svjetlo. Površinska osvetljenost stolova za rad treba da bude 500 luxa. Radi lakše dezinfekcije, površina laboratorijskih stolova je prekrivena plastikom ili tapacirana željezom. Svaki radnik laboratorije ima posebno radno mjesto dimenzija 150 x 60 cm.

Sva radna mjesta opremljena su predmetima potrebnim za svakodnevni bakteriološki rad, čiji je popis dat u tabeli 1.

Tabela 1.

Potrebni predmeti za bakteriološki rad

Naziv stavke	Približna količina
1. Set boja i reagensa za farbanje
2. Stakleni dijapozitivi	25-50
3. Pokrijte naočare	25-50
4. Čaše sa rupama	5-10
5. Stalak za epruvete
6. Bakterijska petlja
7. Staklene lopatice
8. Metalne lopatice
9. Tegla vate
10. Pipete su graduirane na 1, 2, 5, 10 ml	25 svake sveske
11. Pasterove pipete	25-50
12. Pinceta, makaze, skalpel	Do 1
13. Kontejneri sa dezinfekcionim rastvorima
14. Mikroskop sa iluminatorom
15. Lupa 5´
16. Podmazivač sa potapajućim uljem
17. Filter papir	3-5 listova
18. Tegla sa dezinfekcionim rastvorom za pipete
19. Alkohol ili plinski plamenik
20. Instalacija za preparate za bojenje
21. Peščani sat za 1 ili 2 minute	Do 1
22. Kruška sa gumenom cijevi
23. Olovka na staklu
24. Tegla alkoholne vate
25. Neophodan sterilni pribor	-

Dezinfekcija

Dezinfekcija je uništavanje mikroorganizama u objektima životne sredine.

U mikrobiološkim laboratorijama mjere dezinfekcije se vrlo široko koriste. Prilikom završetka rada sa infektivnim materijalom, zaposleni u bakteriološkim laboratorijama provode preventivnu dezinfekciju ruku i radnog mjesta.

Potrošeni patološki materijal (izmet, urin, sputum, razne vrste tečnosti, krv) se dezinfikuje pre nego što se izbacuje u kanalizaciju.

Graduirane i Pasterove pipete, staklene lopatice i metalni instrumenti kontaminirani patološkim materijalom ili kulturom mikroba, odmah nakon upotrebe spuštaju se u staklene tegle sa dezinfekcijskim rastvorom koji se nalazi na stolu na svakom radnom mestu.

Stakalca i pokrivna stakla koja se koriste u radu također podliježu obaveznoj dezinfekciji, jer čak i fiksirani i obojeni razmaz ponekad zadržava vitalne mikroorganizme koji mogu biti izvor intralaboratorijske kontaminacije. Dezinficijensima se ne tretiraju samo ona jela u kojima su uzgajani mikroorganizmi. Stavlja se u metalne rezervoare ili kante, zatvara se i predaje na autoklaviranje.

Izbor dezinficijensa, koncentracija njegove otopine, omjer količine dezinficijensa i materijala koji se dezinficira, kao i trajanje perioda dezinfekcije određuju se ovisno o specifičnim uvjetima, uzimajući u obzir, prije svega, stabilnost dezinficiranih mikroba, stepena očekivane kontaminacije, sastava i konzistencije materijala u kojem se nalaze.

Dezinfekcija ruku nakon rada sa infektivnim materijalom i kada dođe u kontakt sa kožom. Po završetku rada sa infektivnim materijalom, profilaktički se dezinfikuju ruke. Navlažite vatu ili gazu 1% rastvorom hloramina, obrišite prvo lijevu, a zatim desnu ruku sljedećim redoslijedom: stražnja strana šake, palmarnu površinu, interdigitalni prostori, nokti. Dakle, prvo se tretiraju najmanje kontaminirana područja, a zatim se prelazi na najjače kontaminirana područja kože. Obrišite ruke 2 minute sa dva tampona uzastopno. Kada se ruke kontaminiraju kulturom patogenog mikroba ili patološkog materijala, kontaminirana područja kože prvo se dezinficiraju. U tu svrhu se 3-5 minuta prekrivaju vatom navlaženom u 1% rastvoru hloramina, zatim se vata sipa u rezervoar ili kantu sa otpadnim materijalom, a ruke se tretiraju drugim štapićem u istom. način kao i tokom preventivne dezinfekcije. Operite ruke nakon tretmana hloraminom toplu vodu sa sapunom. Kod rada s bakterijama koje stvaraju spore, tretman ruku se provodi sa 1% aktiviranim kloraminom. Ako infektivni materijal dođe u kontakt s rukama, izlaganje dezinficijensu se povećava na 5 minuta.

Sterilizacija

Sterilizacija, za razliku od dezinfekcije, podrazumeva uništavanje svih vegetativnih i sporonosnih, patogenih i nepatogenih mikroorganizama u predmetu koji se steriliše. Sterilizacija se vrši na različite načine: parom, suvim toplim vazduhom, ključanjem, filtracijom itd. Izbor jedne ili druge metode sterilizacije određen je kvalitetom i svojstvima mikroflore predmeta koji se steriliše.

Priprema i sterilizacija laboratorijske opreme

Pre sterilizacije, laboratorijsko stakleno posuđe se opere i osuši. Epruvete, bočice, boce, dušeci i tikvice se zatvaraju čepovima od pamučne gaze. Stavite papirne čepove preko čepova na svaku posudu (osim epruveta).

Gumeni, pluteni i stakleni čepovi se sterilišu u posebnoj vrećici vezanoj za vrat posude. Petrijeve zdjelice se steriliziraju umotane u papir, po 1-10 komada. Pasterove pipete 3-15 kom. umotano u papir za umotavanje. IN gornji dio Svaka pipeta je umetnuta komadom vate kako bi se spriječilo da materijal uđe okruženje. Prilikom umotavanja pipeta treba paziti da se ne odlomi zapečaćeni krajevi kapilara. Tokom rada, pipete se iz vrećice vade za gornji kraj.

Sigurnosni pamuk se ubacuje u gornji dio graduiranih pipeta, kao u Pasteurovim pipetama, a zatim umotava u debeli papir, prethodno izrezan na trake širine 2-2,5 cm i dužine 50-70 cm lijevi kraj se savija i umota vrh pipete, a zatim, rotirajući pipetu, umotava traku papira na njega. Da bi se spriječilo odvijanje papira, suprotni kraj je uvrnut ili zalijepljen. Zapremina umotane pipete je napisana na papiru. Ako postoje pernice, u njima se steriliziraju graduirane pipete.

Laboratorijsko stakleno posuđe se steriliše:

a) suva toplota na temperaturi od 180°C odnosno 160°C u trajanju od 1 sata i 150 minuta.

b) u autoklavu pod pritiskom od 1,5 atm. 60 minuta, za uništavanje mikroflore spora - 90 minuta na 2 atm.

Sterilizacija špriceva. Šprice se sterilišu u rastavljenom obliku: odvojeno cilindar i klip u 2% rastvoru natrijum bikarbonata 30 minuta. Kada se radi sa mikroflorom koja nosi spore, sterilizacija se vrši u autoklavu na 132±2°C (2 atm.) 20 minuta, na 126±2°C (1,5 atm.) - 30 minuta. Sterilizirani špric se sastavlja nakon što se ohladi, u cilindar se ubacuje klip, stavlja se igla, nakon što se iz njega prvo ukloni trn. Igla, cilindar i klip se uzimaju pincetom, koja se zajedno sa štrcaljkom sterilizira.

Sterilizacija metalnih instrumenata. Metalni instrumenti (makaze, skalpeli, pincete itd.) se sterilišu u 2% rastvoru natrijum bikarbonata, što sprečava rđu i gubitak oštrine. Preporučuje se da se oštrice skalpela i makaza omotaju vatom pre nego što ih uronite u rastvor.

Sterilizacija bakterijskih petlji. Bakterijske petlje napravljene od platinaste ili nikromske žice steriliziraju se u plamenu alkoholnog ili plinskog plamenika. Ova metoda sterilizacije naziva se kalcinacija ili flambiranje.

Petlja se postavlja u horizontalni položaj u donjem, najhladnijem dijelu plamena gorionika kako bi se spriječilo prskanje spaljenog patogenog materijala. Nakon što izgori, petlja se prenosi na vertikalni položaj, prvo donji, a zatim gornji dio žice se zagrije usijano i držač petlje progori. Kalcinacija obično traje 5-7 sekundi.

Priprema za sterilizaciju i sterilizaciju papira, gaze i vate. Vata, gaza, filter papir steriliziraju se u suhoj pećnici na temperaturi od 160°C u roku od sat vremena od trenutka kada termometar očita ovu temperaturu ili u autoklavu pod pritiskom od 1 atm. u roku od 30 minuta.

Prije sterilizacije, papir i gaza se režu na komade, a vata se uvalja u kuglice ili tampone potrebne veličine. Nakon toga, svaka vrsta materijala posebno, jedan ili više komada, umota se u debeli papir. Ako se pakiranje pokvari, sterilizirani materijal treba ponovo sterilizirati, jer je njegova sterilnost narušena.

Sterilizacija rukavica i ostalih proizvoda od gume. Gumeni proizvodi (rukavice, tube, itd.) kontaminirani vegetativnim oblikom mikroba steriliziraju se kuhanjem u 2% otopini natrijum bikarbonata ili vodenom parom 30 minuta; kada je kontaminiran mikroflorom koja nosi spore, u autoklavu pod pritiskom od 1,5-2 atm. 30 ili 20 minuta. Prije sterilizacije gumene rukavice se iznutra i izvana posipaju talkom kako bi se spriječilo lijepljenje. Između rukavica se stavlja gaza. Svaki par rukavica se posebno umota u gazu i u tom obliku stavlja u kutije.

Sterilizacija patogenih mikrobnih kultura. Epruvete i čaše sa mikrobnim kulturama koje nisu potrebne za dalji rad stavljaju se u metalni rezervoar, zatvaraju poklopac i podnose na sterilizaciju. Kulture patogenih mikroba, vegetativnih oblika, ubijaju se u autoklavu 30 minuta pod pritiskom od 1 atm. Isporuku rezervoara za sterilizaciju u autoklav vrši posebno određena osoba uz potpis. Režim sterilizacije se evidentira u posebnom dnevniku. Prilikom uništavanja kultura mikroba I i II grupe patogenosti, kao i materijala kontaminiranog ili za kojeg se sumnja da je kontaminiran uzročnicima bolesti iz ovih grupa, cisterne sa otpadnim materijalom se prebacuju na metalne tacne sa visokim stranicama u prisustvu osobe ovlaštene za praćenje. rad sa infektivnim materijalom.

Vrste sterilizacije

Sterilizacija ključanjem. Sterilizacija kuhanjem se vrši u sterilizatoru. Destilirana voda se sipa u sterilizator, jer voda iz slavine stvara kamenac. (Stakljeni predmeti se potapaju u hladnu vodu, metalni predmeti u toplu vodu uz dodatak natrijum bikarbonata). Predmeti za sterilizaciju se kuvaju na laganoj vatri 30-60 minuta. Početkom sterilizacije smatra se trenutak kada voda proključa u sterilizatoru. Na kraju ključanja instrumenti se uzimaju sterilnom pincetom, koja se zajedno sa ostalim predmetima prokuva.

Sterilizacija suvom toplotom. Sterilizacija suvom toplotom vrši se u Pasteur pećnici. Materijal pripremljen za sterilizaciju stavlja se na police tako da ne dolazi u dodir sa zidovima. Orman se zatvara, a zatim se uključuje grijanje. Trajanje sterilizacije na temperaturi od 150°C je 2 sata, na 165°C - 1 sat, na 180°C - 40 minuta, na 200°C - 10-15 minuta (na 170°C okretanje papira i vate žuta, a na višim temperaturama ugljenisana). Početkom sterilizacije smatra se trenutak kada temperatura u pećnici dostigne željenu visinu. Na kraju perioda sterilizacije, pećnica se isključuje, ali se vrata ormarića ne otvaraju dok se potpuno ne ohlade, jer hladan zrak koji ulazi u ormar može uzrokovati stvaranje pukotina na vrućim posudama.

Sterilizacija parom pod pritiskom. Sterilizacija parom pod pritiskom se vrši u autoklavu. Autoklav se sastoji od dva kotla umetnuta jedan u drugi, kućišta i poklopca. Vanjski kotao se naziva vodeno-parna komora, unutrašnji kotao se naziva komora za sterilizaciju. Para se stvara u vodeno-parnom kotlu. Materijal koji se steriliše stavlja se u unutrašnji kotao. Na vrhu kotla za sterilizaciju postoje male rupe kroz koje prolazi para iz vodeno-parne komore. Poklopac autoklava je hermetički pričvršćen na kućište. Pored navedenih glavnih delova, autoklav ima niz delova koji regulišu njegov rad: manometar, vodomerno staklo, sigurnosni ventil, izlazni, vazdušni i kondenzacioni ventili. Manometar se koristi za određivanje pritiska stvorenog u komori za sterilizaciju. Normalno Atmosferski pritisak(760 mm Hg) uzima se kao nula, stoga je u autoklavu u praznom hodu igla manometra na nuli. Postoji određena veza između očitavanja manometra i temperature (tabela 2).

Tabela 2.

Odnos između očitavanja manometra i temperature ključanja vode

Crvena linija na skali manometra određuje maksimalni radni pritisak koji je dozvoljen u autoklavu. Sigurnosni ventil služi za zaštitu od prekomjernog povećanja pritiska. Postavlja se na zadani pritisak, odnosno pritisak pri kojem se mora izvršiti sterilizacija, kada igla manometra pređe liniju, ventil autoklava se automatski otvara i ispušta višak pare, čime se usporava dalji porast pritiska.

Na bočnoj stijenci autoklava nalazi se vodomjerno staklo koje pokazuje nivo vode u vodeno-parnom kotlu. Na staklenoj cijevi vodomjera nalaze se dvije horizontalne linije - donja i gornja, koje označavaju dozvoljeni donji i gornji nivo vode u vodeno-parnoj komori. Vazdušni ventil je dizajniran da odvodi vazduh iz sterilizacione i vodeno-parne komore na početku sterilizacije, jer vazduh, kao loš provodnik toplote, remeti režim sterilizacije. Na dnu autoklava nalazi se slavina za kondenzaciju koja oslobađa komoru za sterilizaciju od kondenzata koji nastaje tokom perioda zagrevanja sterilizovanog materijala.

Pravila za rad sa autoklavom. Prije početka rada pregledajte autoklav i kontrolnu opremu. U autoklavima sa automatskom kontrolom pare, strelice na električnom vakuumskom manometru vodeno-parne komore su postavljene u skladu sa režimom sterilizacije: donja strelica je postavljena na 0,1 atm. donji, gornji - za 0,1 atm. iznad radnog pritiska, vodeno-parna komora se puni vodom do gornje oznake mernog stakla. Za vrijeme punjenja vodom ventil na cijevi kroz koji para ulazi u komoru je otvoren kako bi se omogućio slobodan izlaz zraka iz kotla. Komora za sterilizaciju autoklava je napunjena materijalom koji se steriliše. Nakon toga, poklopac (ili vrata) autoklava se zatvara, čvrsto se učvršćuje centralnom bravom ili vijcima; da biste izbjegli izobličenje, vijke zavijte poprečno (po prečniku). Zatim uključite izvor grijanja ( struja, para), zatvaranje ventila na cijevi koja povezuje izvor pare sa komorom za sterilizaciju. Sa početkom stvaranja pare i stvaranjem pritiska u vodeno-parnoj komori, vrši se pročišćavanje (uklanjanje vazduha iz kotla za sterilizaciju). Način uklanjanja zraka određen je dizajnom autoklava. Najprije zrak izlazi u odvojenim dijelovima, a zatim se pojavljuje glatka, kontinuirana struja pare, što ukazuje da je zrak potpuno istisnut iz komore za sterilizaciju. Nakon uklanjanja zraka, slavina se zatvara i počinje postepeno povećanje tlaka u komori za sterilizaciju.

Početkom sterilizacije smatra se trenutak kada igla manometra pokaže podešeni pritisak. Nakon toga, intenzitet grijanja se smanjuje tako da tlak u autoklavu ostaje na istom nivou potrebno vrijeme. Na kraju vremena sterilizacije, zagrijavanje se zaustavlja. Zatvorite ventil u cjevovodu koji dovodi paru u komoru za sterilizaciju i otvorite ventil na kondenzacijskoj (donjoj) cijevi da smanjite tlak pare u komori. Nakon što igla manometra padne na nulu, polako otpustite stezne uređaje i otvorite poklopac autoklava.

Temperatura i trajanje sterilizacije određuju se kvalitetom materijala koji se steriliše i svojstvima mikroorganizama kojima je zaražen.

Kontrola temperature u komori za sterilizaciju vrši se periodično bakteriološkim testovima. Biotestove proizvode bakteriološke laboratorije Centra za osjetljive nauke. Ako ovi testovi nisu položeni, provjerava se tehničko stanje autoklava.

Sterilizacija tekućom parom. Sterilizacija tekućom parom se vrši u aparatu za protočnu paru Koch ili u autoklavu sa odvrnutim poklopcem i otvorenim izlaznim ventilom. Koch aparat je metalni šuplji cilindar sa duplim dnom. Prostor između gornje i donje donje ploče ispunjen je vodom 2/3 (postoji slavina za ispuštanje preostale vode nakon sterilizacije). Poklopac uređaja ima rupu u sredini za termometar i nekoliko malih rupica za izlazak pare. Materijal koji se steriliše labavo se ubacuje u komoru uređaja kako bi se osigurao maksimalan kontakt s parom. Početkom sterilizacije smatra se vrijeme od trenutka kada voda proključa i para uđe u komoru za sterilizaciju. U aparatu sa fluidnom parom, hranljivi mediji se uglavnom sterilišu, čija se svojstva menjaju na temperaturama iznad 100°C. Sterilizaciju tekućom parom treba ponoviti, jer jedno zagrijavanje na temperaturi od 100°C ne osigurava potpunu dezinfekciju. Ova metoda se naziva frakcijska sterilizacija: sterilizirani materijal se tretira tekućom parom 30 minuta dnevno tijekom 3 dana. U intervalima između sterilizacija materijal se drži na sobnoj temperaturi kako bi spore proklijale u vegetativne forme, koje uginu prilikom naknadnog zagrijavanja.

Tindalizacija. Tindalizacija je frakcijska sterilizacija korištenjem temperatura ispod 100°C, koju je predložio Tyndall. Materijal koji se steriliše se zagrijava u vodenom kupatilu opremljenom termostatom sat vremena na temperaturi od 60-65°C 5 dana ili na 70-80°C 3 dana. U intervalima između zagrevanja, tretirani materijal se drži na temperaturi od 25°C kako bi spore proklijale u vegetativne forme, koje pri naknadnom zagrevanju umiru. Tindalizacija se koristi za defertilizaciju hranljivih podloga koje sadrže protein.

Mehanička sterilizacija pomoću bakterijskih ultrafiltera. Bakterijski filteri se koriste za oslobađanje tekućine od bakterija koje se u njoj nalaze, kao i za odvajanje bakterija od virusa, faga i egzotoksina. Bakterijski filteri ne zadržavaju viruse, pa se ultrafiltracija ne može smatrati sterilizacijom prihvaćenu vrijednost ovu riječ. Za proizvodnju ultrafiltera koriste se fino porozni materijali (kaolin, azbest, nitroceluloza itd.) koji mogu uhvatiti bakterije.

Azbestni filteri (Seitz filteri) su azbestne ploče debljine 3-5 mm i prečnika 35 i 140 mm za filtriranje malih i velikih količina tečnosti. Kod nas se azbestni filteri proizvode u dvije marke: “F” (filterski), koji zadržavaju suspendirane čestice, ali propuštaju bakterije, i “SF” (sterilizirajući), gušći, zadržavajući bakterije. Prije upotrebe azbestni filteri se montiraju u filterske uređaje i zajedno sa njima steriliziraju u autoklavu. Azbestni filteri se koriste jednokratno. Membranski ultrafilteri su napravljeni od nitroceluloze i predstavljaju diskove bijela prečnika 35 mm i debljine 0,1 mm.

Bakterijski filteri se razlikuju po veličini pora i označeni su serijskim brojevima (tablica 3).

Tabela 3.

Bakterijski filteri

Neposredno prije upotrebe, membranski filteri se steriliziraju kuhanjem. Filteri se stavljaju u destilovanu vodu, zagrijanu na temperaturu od 50-60°C, da se ne bi savijali, i kuvaju na laganoj vatri 30 minuta, menjajući vodu 2-3 puta. Kako bi se izbjegla oštećenja, sterilizirani filteri se uklanjaju iz sterilizatora flambiranim i ohlađenim pincetama sa glatkim vrhovima.

Za filtriranje tekućina, bakterijski filteri se montiraju u posebne filterske uređaje, posebno u Seitz filter.

Sastoji se od 2 dijela: gornjeg, u obliku cilindra ili lijevka, i donjeg nosećeg dijela aparata, sa tzv. filter stolom od metalne mreže ili čiste keramičke ploče, na kojoj je membrana ili azbest. postavljen filter. Noseći dio aparata ima oblik lijevka, čiji se suženi dio nalazi u gumenom čepu grla Bunsenove tikvice. U radnom stanju, gornji dio uređaja je pričvršćen za donji dio vijcima. Prije početka filtracije spojevi različitih dijelova instalacije se pune parafinom kako bi se stvorila brtva. Izlazna cijev tikvice spojena je gumenom cijevi debelog zida na vodeni mlaz, ulje ili pumpu za bicikl. Nakon toga, filtrirana tekućina se sipa u cilindar ili lijevak aparata i pumpa se uključuje, stvarajući vakuum u prijemnoj posudi. Kao rezultat nastale razlike tlaka, filtrirana tekućina prolazi kroz pore filtera u prijemnik. Mikroorganizmi ostaju na površini filtera.

Priprema razmaza

Za proučavanje mikroorganizama u obojenom obliku, bris se pravi na stakalcu, suši, fiksira i zatim boji.

Ispitni materijal se raspoređuje u tankom sloju preko površine dobro odmašćenog staklenog tobogana.

Razmazi se pripremaju od mikrobnih kultura, patološkog materijala (sputum, gnoj, urin, krv itd.) i iz organa leševa.

Tehnika pripreme razmaza određena je prirodom materijala koji se proučava.

Priprema razmaza iz mikrobnih kultura sa tečnom hranljivom podlogom i iz tečnog patološkog materijala (urina, likvora, itd.). Mala kap tečnosti za testiranje nanosi se bakterijskom petljom na staklo i kružnim pokretima se petlje raspoređuju u ravnomernom sloju u obliku kruga prečnika novčića za peni.

Priprema razmaza krvi. Kap krvi se nanosi na staklo, bliže jednom od njegovih krajeva. Drugo – brušeno – staklo, koje treba da bude uže od predmetnog stakla, postavlja se na prvo pod uglom od 45° i dovodi do kapi krvi dok ne dođe u dodir sa njim. Nakon što se krv proširi duž polirane ivice, staklom se pravi klizni pokret s desna na lijevo, ravnomjerno raspoređujući krv u tankom sloju po cijeloj površini stakla. Debljina poteza zavisi od ugla između stakala: što je ugao oštriji, to je tanji potez. Pravilno pripremljen bris ima svijetloružičastu boju i istu debljinu po cijeloj površini.

Priprema guste kapi. Kap krvi se nanosi na sredinu stakalca pomoću Pasteurove pipete ili se staklo nanosi direktno na kap krvi koja strši. Krv nanesena na čašu razmazuje se bakterijskom petljom tako da promjer dobivenog razmaza odgovara veličini novčića. Čaša se ostavlja u vodoravnom položaju dok se krv ne osuši. Krv u "debeloj kapi" je neravnomjerno raspoređena, formirajući neravnu ivicu.

Priprema razmaza od viskoznog materijala (sputum, gnoj). Sputum ili gnoj naneseni na stakalcu bliže uskom rubu prekriva se drugim stakalcem. Naočare su blago pritisnute jedna uz drugu.

Nakon toga se slobodni krajevi čaše hvataju prstima 1 i 2 obje ruke i pomjeraju u suprotnim smjerovima tako da pri pomicanju obje čaše čvrsto pristaju jedna uz drugu. Rezultat su mrlje sa ravnomjerno raspoređenim materijalom koji zauzimaju veliku površinu.

Priprema razmaza iz kultura iz čvrstih hranljivih podloga. U sredinu čistog, dobro podmazanog stakalca stavlja se kap vode i u nju se ubacuje bakterijska omča sa malom količinom mikrobne kulture koja se proučava, tako da se kap tečnosti blago zamuti. Nakon toga, višak mikrobnog materijala na petlji se spaljuje u plamenu, a razmaz se priprema prema gore opisanoj metodi.

Priprema briseva iz organa i tkiva. U svrhu dezinfekcije, površina organa se kauterizira zagrijanim čeljustima pincete, na tom mjestu se napravi rez i šiljastim makazama iz dubine izreže mali komadić tkiva koji se stavlja između dva stakla. . Zatim postupite na isti način kao i kada pripremate bris od gnoja i sputuma. Ako je tkivo organa gusto, tada se skalpelom vrši struganje iz dubine reza. Materijal dobiven struganjem raspoređuje se u tankom sloju po površini stakla pomoću skalpela ili bakterijske petlje.

Da bi se proučio relativni položaj elemenata tkiva i mikroorganizama u njemu, prave se razmazi otiska prsta. Da bi se to učinilo, mali komadić tkiva izrezan iz sredine organa hvata se pincetom i nekoliko puta uzastopno nanese na reznu površinu na stakalce, čime se dobija niz mrlja-otisaka.

Sušenje i fiksiranje mrlja. Razmaz pripremljen na predmetnom predmetu se suši na vazduhu i fiksira nakon potpunog sušenja. Kada se fiksira, razmaz se fiksira na površini predmetnog stakla, pa se pri naknadnom bojenju preparata mikrobne ćelije ne ispiru. Osim toga, ubijene mikrobne stanice bolje se boje od živih.

Postoje fizičke metode fiksacije koje se zasnivaju na udaru visoke temperature na mikrobnu ćeliju i hemijske metode koje uključuju upotrebu agenasa koji izazivaju koagulaciju proteina. Nemojte snimati razmazove koji sadrže patogene grupe patogenosti I–II na plamenu.

Fizička metoda fiksacije. Stakalca sa preparatom se uzima pincetom ili prstima I i II desna ruka po rebrima, povucite prema gore i glatkim pokretom pređite 2-3 puta preko gornjeg dijela plamena gorionika. Cijeli proces fiksacije ne bi trebao trajati više od 2 sekunde. Pouzdanost fiksacije provjerava se sljedećom jednostavnom tehnikom: na stražnju površinu lijeve ruke nanosi se površina staklenog predmetnog stakla bez mrlja. Kada je bris pravilno fiksiran, staklo treba da bude vruće, ali da ne izaziva osećaj peckanja.

Metoda hemijske fiksacije. Koriste se i za popravljanje mrlja. hemijske supstance i jedinjenja prikazana u tabeli 4.

Tabela 4.

Supstance za hemijsku fiksaciju

Stakalna pločica sa osušenim razmazom uroni se u bocu sa sredstvom za fiksiranje i zatim se suši na zraku.

Bojenje poteza

Tehnika slikanja premaza. Za bojenje mrlja koriste se otopine boja ili papir za bojenje, kako je predložio A.I. Sinev. Jednostavnost pripreme, lakoća upotrebe, kao i mogućnost čuvanja papira sa mastilom na neograničeno dugo vremena bili su osnova za njihovu široku upotrebu u na razne načine bojanje.

Bojenje poteza papirom sa mastilom. Na osušeni i fiksirani preparat nanosi se nekoliko kapi vode, a papiri u boji veličine 2´2 cm moraju ostati vlažni i čvrsto prianjati uz površinu stakla. Prilikom sušenja, papir se dodatno navlaži vodom. Trajanje bojenja razmaza određuje se metodom bojenja. Na kraju bojenja pažljivo uklonite papir pincetom i isperite mrlju. voda iz česme i suši se na vazduhu ili sa filter papirom.

Mrlje za bojenje rastvorima boja. Boja se na osušeni i fiksirani preparat nanosi pipetom u tolikoj količini da pokrije cijeli razmaz. Prilikom bojenja mrlja koncentriranim otopinama boja (Ziehl carbol fuchsin, carbolic gentian ili kristalno ljubičasto), bojenje se vrši kroz filter papir koji zadržava čestice boje: traka filter papira se stavlja na fiksni razmaz i na njega se izlije otopina boje. .

Za mikroskopski pregled, pripremljeni razmazi, osušeni i fiksirani, se boje. Bojanje može biti jednostavno ili složeno. Jednostavno farbanje uključuje nanošenje jedne boje na mrlju u određenom vremenskom periodu. Najčešće se za jednostavno bojenje koriste alkohol-voda (1:10) Pfeiffer fuksin, Lefflerovo metilensko plavo i safranin. Eozin, kao i kisela boja, koristi se samo za bojenje citoplazme stanica i nijansiranje pozadine. Kiseli fuksin je potpuno neprikladan za bojenje bakterija.

Specifičnosti mikrobiološkog rada zahtijevaju da prostorija namijenjena laboratoriji bude izolirana od dnevnih soba, prehrambenih jedinica i drugih neosnovnih proizvodnih prostorija.

Bakteriološka laboratorija obuhvata: laboratorijske prostorije za bakteriološka istraživanja i pomoćne prostorije; autoklav ili sterilizacija za dezinfekciju otpadnog materijala i kontaminiranog pribora; praonica opremljena za pranje suđa; bakteriološka kuhinja – za pripremu, flaširanje, sterilizaciju i čuvanje hranljivih podloga; vivarij za držanje pokusnih životinja; materijal za skladištenje rezervnih reagensa, posuđa, opreme i kućne opreme.

Navedene pomoćne prostorije, kao samostalne strukturne cjeline, dio su velikih bakterioloških laboratorija. U malim laboratorijama, bakteriološka kuhinja i kuhinja za sterilizaciju su kombinovane u jednoj prostoriji; Ne postoji posebna prostorija za držanje pokusnih životinja.

Prostorije mikrobioloških laboratorija podijeljene su u 2 zone prema stepenu opasnosti za osoblje:

I. “Infektivna” zona - prostorija ili grupa laboratorijskih prostorija u kojima se manipuliše i čuva osoblje u odgovarajućoj vrsti zaštitne odjeće;

II. “Čista” zona - prostorije u kojima se ne radi sa biološkim materijalom, osoblje je obučeno u ličnu odjeću.

Najsvjetlije, najprostranije prostorije dodijeljene su laboratorijskim prostorijama u kojima se provode sve bakteriološke studije. Zidovi u ovim prostorijama, na visini od 170 cm od poda, ofarbani su u svijetle boje uljanom bojom ili obloženi pločicama. Pod je obložen relinom ili linoleumom. Ova vrsta završne obrade omogućava vam korištenje dezinfekcijskih otopina prilikom čišćenja prostorije.

Svaka prostorija treba da ima umivaonik sa tekućom vodom i policu za flašu dezinfekcionog rastvora.

Jedna od prostorija je opremljena staklenom kutijom - izolovanom prostorijom sa predprostorom (preboksom) za obavljanje radova u aseptičnim uslovima. U kutiju se postavlja sto za setvu i stolica, a iznad radnog mesta montirane su baktericidne lampe. U pretprostoru je postavljen ormar za čuvanje sterilnog materijala. Prozori i vrata prostorija u "zaraznoj" zoni moraju biti zapečaćeni. Postojeća izduvna ventilacija iz „zarazne“ zone mora biti izolovana od drugih ventilacionih sistema i opremljena finim filterima za vazduh.

Laboratorijska prostorija je opremljena laboratorijskim stolovima, ormarićima i policama za odlaganje opreme, pribora, boja i reagensa neophodnih za rad.

Za rad bakteriologa i laboratorijskog asistenta veoma je važna pravilna organizacija radnog mjesta. Laboratorijski stolovi su postavljeni u blizini prozora. Kada ih postavljate, treba nastojati da svjetlo pada ispred ili sa strane osobe koja radi, po mogućnosti s lijeve strane, ali ni u kojem slučaju s leđa. Preporučljivo je da prostorije za analizu, posebno za mikroskopiju, imaju prozore orijentisane na sjever ili sjeverozapad, jer je za rad potrebno ravnomjerno, difuzno svjetlo. Površinska osvetljenost stolova za rad treba da bude 500 luxa. Radi lakše dezinfekcije, površina laboratorijskih stolova je prekrivena plastikom ili tapacirana željezom. Svaki radnik laboratorije ima posebno radno mjesto dimenzija 150 x 60 cm.

Sva radna mjesta opremljena su predmetima potrebnim za svakodnevni bakteriološki rad, čiji je popis dat u tabeli 1.

Tabela 1.

Potrebni predmeti za bakteriološki rad

Naziv stavke	Približna količina
1. Set boja i reagensa za farbanje
2. Stakleni dijapozitivi	25-50
3. Pokrijte naočare	25-50
4. Čaše sa rupama	5-10
5. Stalak za epruvete
6. Bakterijska petlja
7. Staklene lopatice
8. Metalne lopatice
9. Tegla vate
10. Pipete su graduirane na 1, 2, 5, 10 ml	25 svake sveske
11. Pasterove pipete	25-50
12. Pinceta, makaze, skalpel	Do 1
13. Kontejneri sa dezinfekcionim rastvorima
14. Mikroskop sa iluminatorom
15. Lupa 5´
16. Podmazivač sa potapajućim uljem
17. Filter papir	3-5 listova
18. Tegla sa dezinfekcionim rastvorom za pipete
19. Alkohol ili plinski plamenik
20. Instalacija za preparate za bojenje
21. Peščani sat za 1 ili 2 minute	Do 1
22. Kruška sa gumenom cijevi
23. Olovka na staklu
24. Tegla alkoholne vate
25. Neophodan sterilni pribor	-

Oprema za kliničku mikrobiologiju

Savremena oprema za automatizaciju svih faza mikrobiološkog procesa u mikrobiološkoj laboratoriji omogućava vam da brzo identifikujete mikroorganizme i odredite njihovu osjetljivost na antimikrobne agense kako biste rano propisali adekvatnu terapiju.

Automatizacija mikrobiološke laboratorije omogućava:

• Smanjenje vremena za postizanje rezultata na 24-72 sata
• Smanjenje grešaka
• Efikasno smanjiti troškove rada
• Povećanje produktivnosti
• Povećanje efikasnosti lečenja pacijenata
• Odbij prosječno trajanje krevet-dan
• Sposobnost analiziranja situacije u realnom vremenu
• Standardizacija rezultata očitavanja at
• Kreiranje baze podataka

Potpuno automatizovana bakteriološka laboratorijaBioMerieux

Mikrobiološka oprema Biovitrum

Kompanija Biovitrum jedan je od lidera u proizvodnji i isporuci specijalne mikrobiološke opreme u Rusiji. Proizvodimo i prodajemo opremu za mikrobiološka istraživanja razvijenu korištenjem najinovativnijih tehnologija.

Oprema mikrobiološke laboratorije mora u potpunosti odgovarati savremenim standardima kvalitetu, proizvodnost i sigurnost i pomažu istraživaču da što efikasnije riješi postavljene probleme. Uz specijalizovane instrumente i uređaje, mikrobiološka laboratorija mora imati i mikrobiološka laboratorija opšta laboratorijska oprema , omogućavajući poboljšanje kvaliteta i produktivnosti laboratorijskih asistenata.

Savremena opća laboratorijska oprema neophodna za rad mikrobiološke laboratorije

Rad mikrobiologa obavlja se u uslovima strogog steriliteta, čime se izbegava mikrobna kontaminacija i dijagnostičke greške. Pomaže u održavanju sterilnih uvjeta i zaštiti laboratorijskog osoblja i objekata u kulturi koja se proučava od mikrobne kontaminacije. Ova vrsta je sastavni element opremanja mikrobiološke laboratorije, pružajući ultra čiste radne uslove. Jedan od obaveznih instrumenata u mikrobiološkoj laboratoriji je , koristi se za razdvajanje rastvora i tečnih smeša u frakcije različite gustine. Laboratorijska oprema opšte namjene uključuje i skladištenje reagensa i održavanje radnih temperatura. Upotreba hladnjaci na niskim temperaturama omogućava vam da zamrznete i sigurno pohranite biološke uzorke na temperaturama do -150°.

Analitička i pomoćna opća laboratorijska oprema

Proširiti funkcionalnost mikrobiološka laboratorija omogućava korištenje analitičkih opšta laboratorijska oprema . Moguće je kvalitativno i kvantitativno okarakterizirati sastav proučavanih uzoraka uz pomoć povećanja produktivnosti i lakoće upotrebe tokom rutinskih istraživanja.