HIV-nakkuse diagnoosimise meetod. Peamine meetod HIV-nakkuse diagnoosimiseks

1. Seroloogilised meetodid HIV-vastaste antikehade (AT) tuvastamine - HIV-nakkuse diagnoosimise standard (sünteetilistel peptiididel põhinevad ELISA testisüsteemid - on peaaegu 100% tundlikkuse ja spetsiifilisusega). ELISA võimaldab tuvastada HIV Ag-sid, mis võivad olla varajase nakatumise või vastupidi HIV-nakkuse hilise kaugelearenenud arengu näitajad (p24 Ag)

2. Kinnitavad testid- immunoblotanalüüs (IB), kaudne immunofluorestsents (IIF) ja radioimmunosadestamine (RIP).

a) WHO soovitab lugeda positiivseks seerum, mis sisaldab antikehi kahe ümbrise valgu ja ühe HIV sisevalgu vastu. Patsiente, kes on ELISA-ga positiivsed, kuid kellel on IB tulemused ebamäärased, tuleb hinnata kliiniliselt ja hinnata muul viisil. arstlik läbivaatus, immunoloogiliselt ja 3–6 kuu möödudes tuleb nende vereseerumist testida HIV-vastaste antikehade suhtes.

b) kaudse immunofluorestsentsi (IIF) meetod – kasutatakse kinnitava testina paljudes laborites või sõeltestina.

c) radioimmunosadestamine – ülitundlik ja spetsiifiline meetod, mis põhineb radioaktiivsete isotoopidega märgistatud aminohapete kasutamisel. Meetod on pinnavalkude vastaste antikehade tuvastamisel väga tundlik ja seetõttu väga spetsiifiline, kuna need viiruse komponendid esinevad pärast serokonversiooni peaaegu kõigil HIV-nakkusega inimestel.

3. Molekulaarbioloogilised meetodid: nukleiinhapete molekulaarse hübridisatsiooni meetod, PCR

PCR-i kasutatakse:

1) alternatiivse ja täiendava kinnitava meetodina viiruse esinemise tuvastamiseks organismis seoses laboridiagnostika seroloogiliste meetoditega;

2) esimese spetsiifilise analüüsi meetodina HIV-nakkuse varajase diagnoosimisel, kui spetsiifilisi viirusevastaseid antikehi veel ei ole;

3) HIV-nakkusega emade vastsündinute HIV-nakkuse diagnoosimiseks;

4) määrata viiruskoormus ja määrata spetsiifiline retroviirusevastane ravi ning jälgida selle elluviimist;

5) selgitava meetodina ebaselgete seroloogiliste tulemuste ning seroloogiliste ja kultuuriliste analüüside lahknevuse korral;

6) uurimistöö käigus seksuaalpartnerid HIV-nakatunud isikud;

7) HIV-1 ja HIV-2 diferentsiaaldiagnostika meetodina;

4. Viroloogiline meetod.

HIV-nakkuse ravi:

1. Antiretroviirusravi põhimõtted: ravi tuleb alustada enne olulise immuunpuudulikkuse tekkimist; esialgne ravi peaks hõlmama vähemalt kolme ravimi kombinatsiooni; ravi muutmine peaks hõlmama vähemalt kahe uue ravimi asendamist või lisamist; Äärmiselt oluline on mõõta CD4+ rakkude taset ja viiruskoormust; viiruskoormuse vähenemine tundlike meetodite avastamispiirist madalamale tasemele peegeldab optimaalset raviefekti.

2. Kaasaegseid retroviirusevastaseid ravimeid on kolm rühma:

a) nukleosiid-pöördtranskriptaasi inhibiitorid (NRTI-d): zidovudiin (asidotümidiin, retroviir); didanosiin (ddI, Videx); zaltsitabiin (ddC, hivid); stavudiin (zerit, d4T); lamivudiin (3TC, epiviir); abakaviiri; adefoviir; kombiviir (zidovudiin + abakavir); triziviir (zidovudiin+lamivudiin+abakaviir); adefoviir (nukleotiid-pöördtranskriptaasi inhibiitorid).

b) mittenukleosiidsed pöördtranskriptaasi inhibiitorid (NNRTI-d): delaverdiin (reskriptor); nevirapiin (viramune); efavirens

c) proteaasi inhibiitorid (PI): sakvinaviir; ritonaviir (norvir); indinaviir (Crixivan); nelfinaviir (Viracept); amprenaviir (Agenerase); lopinaviir (aluviraan); Kaletra (lopinaviir + ritonaviir).

3. Monoteraapia ühegi ravimiga ei suuda tagada HIV replikatsiooni piisavalt väljendunud ja pikaajalist pärssimist. Pealegi suureneb monoteraapia korral resistentsete tüvede tekke oht ja ristresistentsuse kujunemine sama rühma ravimite suhtes. Ainsaks erandiks on zidovudiini kasutamine monoteraapiana riski vähendamiseks perinataalne ülekanne HIV.

4. Enamik oluline kriteerium Ravi efektiivsuse määrab viiruskoormuse dünaamika, mis tuleks määrata: ilma ravita - iga 6-12 kuu tagant, ravi ajal - iga 3-6 kuu järel ja ka 4-8 nädalat pärast viirusevastase ravi algust.

Lisaks retroviirusevastasele ravile on vajalik sekundaarsete haiguste ravi.

34.3 AIDS (kliinilised variandid, oportunistlikud haigused).

Oportunistlikud haigused- rasked, progresseeruvad haigused, mis arenevad süveneva immuunsupressiooni taustal ja ei esine normaalselt toimiva immuunsüsteemiga inimesel (AIDS-i määravad haigused).

a) esimene rühm- need on haigused, mis on iseloomulikud ainult raskele immuunpuudulikkusele (CD4+ tase< 200 кл/мкл) и поэтому определяют kliiniline diagnoos: 1. Söögitoru, hingetoru, bronhide kandidoos. 2. Ekstrapulmonaalne krüptokokoos. 3. Krüptosporidioos koos kõhulahtisusega üle 1 kuu. 4. Tsütomegaloviiruse infektsioon, mis mõjutab muid organeid peale maksa, põrna või lümfisõlmede. 5. Viiruse põhjustatud infektsioonid herpes simplex, mis avaldub haavanditena nahal ja limaskestadel. 6. Kaposi sarkoom alla 60-aastastel isikutel. 7. Primaarne aju lümfoom alla 60-aastastel isikutel. 8. Lümfotsüütiline interstitsiaalne kopsupõletik ja/või pulmonaalne lümfoidne hüperplaasia alla 12-aastastel lastel. 9. Kopsuvälise lokaliseerimisega ebatüüpiliste mükobakterite põhjustatud dissemineerunud infektsioon. 10. Pneumocystis kopsupõletik. 11. Progresseeruv multifokaalne leukoentsefalopaatia. 12. Toksoplasmoos koos aju-, kopsu- ja silmade kahjustusega üle 1 kuu vanusel patsiendil.

b) teine ​​rühm- haigused, mis võivad areneda nii raske immuunpuudulikkuse taustal kui ka mõnel juhul ilma selleta: 1. Bakteriaalsed infektsioonid, kombineeritud või korduvad alla 13-aastastel lastel (rohkem kui kaks juhtumit 2-aastase vaatluse jooksul): septitseemia, kopsupõletik, meningiit, luu- või liigesekahjustused, Haemophilus influenzae põhjustatud abstsessid, streptokokid. 2. Dissemineeritud koktsidioidomükoos (ekstrapulmonaalne lokalisatsioon). 3. HIV entsefalopaatia 4. Histoplasmoos, mis on levinud ekstrapulmonaalse lokaliseerimisega. 5. Isosporoos koos kõhulahtisusega, mis kestab kauem kui 1 kuu. 6. Kaposi sarkoom igas vanuses inimestel. 7. B-rakulised lümfoomid (va Hodgkini tõbi) või tundmatu immunofenotüübiga lümfoomid. 8. Kopsuväline tuberkuloos. 9. Salmonella septitseemia on korduv. 10. HIV-düstroofia.

Kõige levinumad on Pneumocystis kopsupõletik, krüptokokk-meningoentsefaliit, generaliseerunud tsütomegaloviiruse infektsioon(entsefaliit, retiniit, ösofagiit, hepatiit, koliit), segaetioloogiaga sepsis, Kaposi sarkoomi generaliseerunud vorm, kopsutuberkuloos.

Kõik need haigused tekivad ühe või mitme organi ja süsteemi kahjustusega: aju, kopsud, maks, seedetrakti ja on tugevalt progresseeruva iseloomuga. AIDS-i defineerivad haigused esinevad erinevates kombinatsioonides ja isegi piisav ravi ei anna oodatud efekti.

AIDSi kliinilised variandid: nakkuslik, neuro-, onkoloogiline AIDS, olenevalt erinevate kliinikute levimusest.

Tõhusa ravi määramiseks on vajalik HIV-nakkuse diagnoosimine. AIDSi diagnoosimiseks viiakse see läbi standardprotseduur patsiendi uuringud. See koosneb 2 etapist:

• sõeluuringu läbimine;
• immunoblotanalüüs.

Diagnoosi tegemiseks on lisaks ette nähtud PCR ja kiirtest.

ELISA läbiviimine

AIDSi esialgne diagnoos põhineb spetsiifiliste antikehade poolt kinni püütud HIV laborivalkude kasutamisel. Pärast nende kokkupuudet katsesüsteemi ensüümidega muutub indikaatori värvus. Seejärel töödeldakse muudetud värviskeemi spetsiaalse varustuse abil, mis määrab testi tulemuse.

Selline HIV-nakkuse laboratoorne diagnoos näitab tulemusi 21 päeva pärast nakatumist. ELISA abil ei saa viiruse olemasolu kindlaks teha. See meetod diagnostika aitab tuvastada viiruse antikehade tootmist. Sarnast protsessi võib täheldada 2-6 nädalat pärast nakatumist.

Eksperdid eristavad 4 erineva tundlikkusega ELISA süsteemide põlvkonda. Arstid kasutavad sagedamini 3. ja 4. põlvkonna teste. Need süsteemid põhinevad sünteetilise päritoluga rekombinantsetel valkudel või peptiididel, millel on märkimisväärne täpsus ja spetsiifilisus. Viiruse leviku tuvastamiseks ja jälgimiseks kasutatakse ELISA-d, mis tagab ohutuse annetatud vere testimisel. Selliste süsteemide täpsus jääb vahemikku 93-99%. Testid avaldati aastal Lääne-Euroopa. Diagnostika teostamiseks võtab laborant veeniverd (5 ml). Soovitatav on hoiduda söömisest 8 tundi enne analüüsi. Uuring viiakse sageli läbi hommikul.

Andmete dekrüpteerimine

Katsetulemuste saamiseks kulub 10 päeva. Kui tulemus on negatiivne, siis patsient ei ole nakatunud. Sellisel juhul ei ole ravi ette nähtud. Vale negatiivne tulemus paljastas:

• kuni 3 nädalat pärast nakatumist;
• AIDSi viimases staadiumis madala immuunsüsteemiga;
• vere vale ettevalmistamise tõttu.

Kui tulemus on positiivne, on patsient nakatunud. Sel juhul teostatakse infoturvet. Vale positiivne tulemus näitab kohalolekut kaasnevad haigused ja vere vale ettevalmistamine. Kui testimine on näidustatud rasedatele naistele, saab arst kogutud materjalist tuvastada mittespetsiifilisi antikehi, mille tootmine ei ole viirusega seotud. Kogutud materjali uuritakse referent- või arbitraažilaboris. Kui kordustesti tulemus on negatiivne, on esimene tulemus ekslik. Sel juhul infoturvet ei teostata.

Immunoblotanalüüsi läbiviimine

Positiivse tulemuse saamisel määratakse AIDS-i ravi immunoblotanalüüs. See diagnostiline meetod viiakse läbi nitrotselluloosi riba abil, millele kantakse viirusvalgud. Infoturbe tagamiseks kasutavad nad venoosne veri, mida seejärel töödeldakse. Vadakus leiduvad valgud jaotatakse nende laengu ja molekulmassi alusel rühmadesse. Selle protsessi läbiviimiseks kasutatakse spetsiaalseid seadmeid.

Kui uuritavas materjalis on viiruse antikehi, ilmuvad ribale vastavad jooned. Positiivne IB näitab, et patsient on HIV-nakkusega. Küsitav tulemus tuvastatakse esialgsed etapid infektsioonid, tuberkuloos ja onkoloogia, rasedatel. Sellistel juhtudel on soovitatav korduv IS.

Määramatu IB tulemus näitab ühe või mitme valgu olemasolu viiruses immunoblotis. Sarnast pilti täheldatakse hiljutise infektsiooni korral, kui veres on väike kogus infektsioonivastaseid antikehi. Sel juhul on infoturve mõne aja pärast positiivne. Ebakindel tulemus see uuring võib olla seotud HIV-nakkuse puudumisega hepatiidi, krooniliste ainevahetushaiguste ja raseduse ajal. Sel juhul muutub IB negatiivseks või spetsialistid tuvastavad patsiendi ebakindla tulemuse põhjuse.

PCR-uuringud

Kui viirus siseneb inimkehasse, mõjutab see kaitsesüsteemi. Sest inkubatsiooniperiood tüüpiline periood 3 kuud. Seetõttu on pärast seksuaalset kontakti HIV-nakatunud partneriga soovitatav läbida PCR-diagnostika. See võimaldab teil määrata viiruse RNA-d. Ajavahemik, mille jooksul selline uuring on soovitatav läbida, on 8-24 kuud.

Lõpliku diagnoosi tegemiseks on näidustatud regulaarne vereloovutus HIV-nakkuse jaoks (üks kord 3 kuu jooksul). Tõttu kõrge tundlikkus see läbivaatus võimaldab tuvastada viiruse 10 päeva pärast nakatumist. PCR-i valepositiivse tulemuse võib saada ka siis, kui patsiendi kehas on mõni muu infektsioon. PCR-uuringud Seda peetakse kulukaks protseduuriks, kuna see nõuab spetsiaalset varustust.

PCR on ette nähtud viiruse tuvastamiseks järgmistel inimestel:

• HIV-nakkusega emalt sündinud vastsündinu;
• kahtlase IB-ga patsiendid.

Samuti seda tehnikat näidustatud viiruse kontsentratsiooni jälgimiseks veres ja doonorivere testimiseks.

Kiired uurimismeetodid

TO kaasaegsed meetodid Eksperdid viitavad AIDSi diagnoosimiseks kiirtestidele. Nende dešifreerimiseks kulub 10–15 minutit. Kapillaarvoolul põhinevad immunokromatograafilised testid annavad täpseid tulemusi. Sellised testimissüsteemid on esitatud spetsiaalsete ribadena, millele kantakse verd või sülge. Kui viirus on olemas, ilmub 10 minuti pärast testile 2 triipu:

• kontroll;
• värviline.

IN sel juhul testi tulemus on positiivne iseloom. Negatiivset tulemust näitab ühe kontrolljoone ilmumine. Saadud tulemuse kinnitamiseks viiakse läbi infoturve. Üldandmete põhjal teeb arst diagnoosi ja määrab ravi.

Viiruse saate tuvastada kodus. Sel eesmärgil kasutatakse spetsiaalseid ekspresskomplekte. OraSure Technologies1 on USA-s välja töötatud süsteem. Kui pärast testimist leitakse positiivne tulemus, soovitatakse patsiendil läbida täielik läbivaatus meditsiinikeskuses.

Lapse läbivaatus

Nakatunud emadelt sündinud vastsündinuid uuritakse kiiresti. Seroloogilised meetodid ei suuda viirust 5–18 kuu vanustel lastel täpselt tuvastada. Kuid sellise küsitluse tulemus on infoturbe läbiviimisel oluline.

Laste nakkust saab tuvastada PCR abil. Viiruse DNA tuvastab spetsialist lastel esimesel elukuul. Patogeeni RNA kontsentratsiooni määramiseks määravad spetsialistid immuunpuudulikkuse viiruse proviiruse. Uuringu jaoks kasutab arst täisverd või kuivatatud vereplekki. Materjal asetatakse EDTA säilitusainega (vahekorras 1:20) katseklaasi. Proovi tuleb hoida temperatuuril mitte üle 8°C (2 päeva). Materjali külmutamine ei ole lubatud.

Kuivatatud vereproovi saamiseks kantakse kogu vedelik spetsiaalsele paberile. Proovi võib säilitada temperatuuril alla 8°C. Kaarte kasutatakse 8 kuud. Vastsündinud last tuleb läbi vaadata, võttes materjali uurimiseks, järgmiste perioodide jooksul:

• 48 tundi pärast sündi;
• 2 kuu vanuselt pärast sündi;
• 3-6 kuud pärast sündi.

Kui arst tuvastas HIV proviiruse geeni paar tundi pärast lapse sündi, oli laps nakatunud emakasisene. Viirusse võib nakatuda sünnituse ajal või rinnaga toitmine. Tulemused, mis näitavad viiruse DNA esinemist 2 proovis, näitavad AIDSi arengut lapsel. Dispanseri vaatlus ei ole nõutav, kui PCR tulemused on negatiivsed 4 kuud pärast lapse sündi.

Kui testi tulemus on negatiivne, kuid esinevad AIDS-i sümptomid, on soovitatav konsulteerida arstiga. Sellist kliinikut võivad provotseerida muud haigused. Testimist peetakse ainsaks ja 100% viiruse diagnoosimise meetodiks. Isegi kvalifitseeritud ja kogenud spetsialistid ei suuda viirust sümptomite järgi tuvastada.

Kui mõne aja pärast on patsiendi tulemused negatiivsed, pole HIV-i kehas.

See ei võta sümptomeid arvesse. Aga sarnased kliiniline pilt võib olla seotud AIDS-i foobiaga. Sel juhul on vaja psühholoogi abi. Vajadusel määratakse lapsele või täiskasvanule vastav ravi.

HIV-nakkuse diagnoosimine viiakse läbi lõpliku diagnoosi tegemiseks. Kui patsient on nakatumises kindel, ei tohiks ta ise ravida: ta peab konsulteerima spetsialistiga.

AIDS-i maski all võib peituda palju haigusi, mida saab ravida arstiga konsulteerides. Nakkuse analüüsid on kõige levinumad ja varajane meetod diagnostika

Nakatumise astme määramine jätkub laboris ELISA või PCR abil vereanalüüsi tegemisel.

HIV-nakkuse epidemioloogiliste näitajate halvenemise tõttu suur tähtsus omandatud haiguse varajane äratundmine. Arst viib läbi diferentsiaaldiagnostika HIV-nakkus, kogub haiguse kohta epidemioloogilist teavet.

Nakkuse meetodite uurimise käigus viib spetsialist läbi selliseid uuringuid nagu:

• HIV-nakkuse tekkemehhanismi uurimine;
• seotud vaevuste diagnoosimine.

HIV-nakkuse diagnoosimise meetodid on suunatud antikehade tuvastamisele ELISA-s ning diagnoosi kinnitamisel teeb spetsialist koos patsiendiga selgitustööd tema vastavuse kohta reeglitele, et vältida haiguse levikut.

AIDS-i testimine on ette nähtud lastele, kes on sündinud nakatunud emadele pärast retroviirusevastast ravi. Sõeluuringud tuvastavad HIV 1 ja 2 antikehad.

Immunoblot on olemuselt kinnitav ja tuvastab HIV-nakkuse valkude vastaseid antikehi.

Immuunpuudulikkuse varajane diagnoosimine võimaldab patsiendil kiiresti muuta elustiili, alustada ravi ja saada psühholoogiline abi. Patsiendile iseloomulikud kaebused aitavad arstil alati AIDSi kahtlustada ja patsiendi vere laborisse analüüsimiseks saata.

4. põlvkonna AIDSi kiirtestid

Laboratoorsed diagnostikad HIV-nakkus, mis viiakse läbi 4. põlvkonna testidega, võimaldab teil kindlaks teha haiguse ägedas faasis. Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo test on väga tundlik patsiendi vereseerumis sisalduvate antigeenide ja antikehade suhtes. Uuringu spetsiifilisus on Ab liini puhul 99,19% ja Ag liini puhul 99,64% ning positiivne ennustusväärtus määratakse 55% piires.

Analüüsi tundlikkus määratakse eelnevalt kindlaksmääramise teel teadaolevad tulemused. Positiivsete andmete saamisel ulatub valede arvude tõenäosus 45%-ni.

Suu tampooni test tehakse kodus. Uuring on patsiendile mugav, lihtne ja valutu. ImmunoChrome-½-Expressi testriba kasutatakse selleks analüüside läbiviimine ja annab stabiilse tulemuse, kui patsient järgib ravimiga kaasasolevaid juhiseid. Kui katsealal ja kontrollalal tuvastatakse kaks identset lillat triipu, loetakse test positiivseks. Ühe riba olemasolu tõlgendatakse negatiivse testitulemusena.

Uuringule kuluv aeg on 15–30 minutit.

Haiguse diagnoosimine inkubatsiooniperioodil

Lüüa immuunsussüsteem tekib siis, kui viirus siseneb patsiendi kehasse. Inkubatsiooniperiood kestab 3 kuud.

Pärast soovimatut ja ohtlikku kontakti partneriga on vaja teha PCR-test ja saadud tulemuste põhjal teha järeldus HIV-nakkuse olemasolu kohta organismis. Immuunpuudulikkuse diagnoosimise alustamise maksimaalne periood on 8-9 kuud ja in erandjuhtudel seda pikendatakse 2 aastani.

Haiguse lõplikuks diagnoosimiseks viiakse uuring läbi aasta jooksul; iga 3 kuu järel loovutab patsient HIV-i jaoks verd. Kohene kontakt spetsialistiga pärast ohtlikku kokkupuudet vähendab nakatumise tõenäosust 90%.

Laboratoorseks diagnostikaks varajane periood haigused kasutavad meetodit polümeraasi reaktsioon, määratledes nukleiinhapped. Analüüsi tulemused dešifreeritakse mõne tunni jooksul, säilitades samal ajal täieliku anonüümsuse.

Loov MP-HIV ½ HIV/AIDSi test viiakse läbi kodus, 4 nädalat pärast ohtlikku kokkupuudet. Testikassetid tuvastavad HIV viiruse nr 1 ja 2 antikehad.

AIDSi kiire diagnoosimise meetodid lastel

Nakatunud emadele sündinud lapsi testitakse AIDS-i viiruse suhtes. Seroloogilised meetodid haiguse tuvastamiseks ei ole alati kinnitatud 5-18 kuu vanustel lastel, kuid tulemus on järgnev. positiivne väärtus immunoblotis.

Ülitundlik PCR-meetod võimaldab teil määrata AIDS-i viiruse olemasolu lapse kehas.

Haigustekitaja DNA tuvastatakse lapsel esimesel elukuul. Immuunpuudulikkuse proviiruse tuvastamise süsteem on loodud patogeeni RNA kontsentratsiooni määramiseks.

Analüüsiks sobivad täisveri või kuivanud verelaigud. Proov asetatakse katseklaasi, milles on EDTA säilitusainet vahekorras 1:20. Säilitage materjali kaks päeva temperatuuril 2–8 °C, vältides vere külmumist.

Kuivatatud vereproovid saadakse, kandes kogu vedeliku spetsiaalsele paberile. Diagnostilist materjali hoitakse temperatuuril mitte üle 8 °C. Kaartide kasutusaeg ei ületa 8 kuud.

Vastsündinu uurimine ja analüüside võtmine toimub järgmistel aegadel: 2 päeva pärast sündi, kahe kuu vanuselt, 3-6 kuu pärast. HIV proviiruse geeni tuvastamine paar tundi pärast sündi viitab loote nakatumisele sünnieelsel perioodil. Nakatumine võib tekkida sünnituse ajal või lapse rinnaga toitmise ajal.

Andmed, mis kinnitavad viiruse DNA olemasolu kahes kontrollproovis, viitavad HIV-nakkuse tekkele lapsel.

Dispanseri vaatlus tühistatakse pärast kättesaamist negatiivsed testid PCR meetod 4 kuud peale lapse sündi.

Vead uuringu käigus

Valepositiivne test immuunpuudulikkuse viiruse esinemise kohta patsiendi veres mitmel põhjusel moonutab haiguse määramise täpsust. Kodus testi tegemisel ootavad patsienti vead.

Vale tulemus ilmub siis, kui patsiendil on sellised seisundid nagu ristreaktsioon, rasedus, veredoonorid, gripiviirusega nakatumine, haigus hingamisteed, autoimmuunhaigused, vähk, skleroos.

Allergia soodustab patsiendi kehale võõraste antigeenide tootmist. Testisüsteem tunneb need ära ja annab vale tulemuse. Seene, viirusnakkus aidata kaasa AIDSi viiruse esinemise ebaõigele määramisele.

Infektsiooni tuleb ravida ja seejärel AIDSi suhtes testida. Kvaliteetse uuringutulemuse saamiseks on patsient kohustatud arstile rääkima kaasuvatest vaevustest ja toimuvast ravist.

Diagnoos ELISA abil

Meetodi abil tuvastatud antikehade üldine spekter ensüümi immuunanalüüs, esineb 95% AIDS-i viirusega nakatunud inimestest. Positiivne kahekordne ELISA tulemus nõuab teise kinnitava etapi - immunoblot-testi - olemasolu. See koosneb antikehade ja nende seoste uurimisest patogeeni üksikute valgustruktuuridega. ELISA testil on kaks reaktsiooni: ensümaatiline ja immunoloogiline. Analüüs põhineb antikehade ja antigeenide koostoimel.

Antikehad, immuunkompleks ja ensüümi aktiivsus määratakse järjestikku. Spetsialist dešifreerib analüüsi andmed. Negatiivsed näitajad näitavad HIV-nakkuse puudumist patsiendil.

Antikehade puudumisel ja hiljutise infektsiooni korral määrab arst valenegatiivse tulemuse.

Kui viiruse uurimise materjali proove hoitakse hooletult, võivad saadud näitajad olla valed.

Pärast patsiendi vaktsineerimist tehtud test annab positiivse tulemuse ja ei saa olla usaldusväärne.

Peaksite korralikult ette valmistama seerumite lahjenduse, puhastama kasutatud plaadid ja ostma kvaliteetse värvaine.

Immunoboltimise positiivne tulemus avaldub GP 41 ja GP 120 ribade ja antigeeni kombinatsioonis. Negatiivset tulemust näitab ribade puudumine.

Diagnostilise järelduse tegemisel võetakse arvesse analüüside tulemusi, patsiendi haiglas läbivaatuse näitajaid ja patsiendi epidemioloogilist uuringut.

HIV-nakkuse varajane diagnoosimine on hädavajalik. Sellest sõltub teraapia keerukus ja areng patoloogilised tüsistused. Tänapäeval on neid palju uuenduslikud meetodid uuringud selliste tuvastamiseks kohutav diagnoos. See on täpselt see, millest järgmisena arutatakse.

Millised meetodid on olemas HIV-nakkuse diagnoosimiseks?

Tegelikult on HIV-i diagnoosimiseks palju meetodeid. Keskmiselt jagunevad nad alarühmadesse - laborianalüüs, diferentsiaalkontroll ja riistvara. Lisaks on vaja arvestada etappidega diagnostilised meetmed. Sellest kõigest ja muudest aspektidest räägime üksikasjalikumalt hiljem.

Laboratoorsed diagnostikad

Vaadeldav diagnostiline meetod nõuab kõrgelt spetsialiseeritud laborit. Sellistel tingimustel võib tuvastada järgmised näidustused:

• Määratakse antikehad, patogeeni antigeenid ja immuunkompleksid.
• Kui viirus avastatakse, siis seda kultiveeritakse ning tuvastatakse genoomne materjal ja ensüümid.
• Hinnatakse immuunsüsteemi funktsionaalsust.
• Teostatakse epidemioloogilist järelevalvet ja inimese immuunpuudulikkuse viiruse levimuse seiret.
• Uuritakse leviku dünaamikat ja määratakse populatsioon.
• Siirdamise ja vereülekande ohutuse saab kindlaks teha.

Vastava HIV patogeeni avastamisel suunatakse patsient edasi täiendav läbivaatus. Pärast seda registreeritakse isik haiguse progresseerumise edasiseks jälgimiseks.

Diferentsiaaldiagnostika

Seda haigust eristatakse erinevatel põhjustel:

• HIV-nakkuse esimeste sümptomite ilmnemisel, mis on ägedas faasis, eriti kui esineb mononukleoositaoline sündroom. Diagnoos põhineb sellistel patoloogiatel nagu nakkuslik mononukleoos, süüfilis, punetised, adenoviirus, leukeemia äge vorm, jersinioos, hüperkeratoos.
• Kui HIV läheb püsiva iseloomuga generaliseerunud lümfadenopaatia staadiumisse, siis haigused, milles Lümfisõlmed suurendama. Näiteks lümfotsütaarne leukeemia, süüfilis, toksoplasmoos, lümfogranulomatoos. Selles faasis muutuvad patsiendi sümptomid selgemaks.
• Sekundaarsete patoloogiate tuvastamisel eristatakse teatud ravimirühmade võtmise ajal tekkinud immuunpuudulikkust - kiiritusravi, glükokortikosteroidide ja tsütostaatikumide kasutamine. Immuunsus väheneb oluliselt ka selliste haiguste puhul nagu müeloom, lümfoidne leukeemia, vähk jne.
• Kui HIV on lokaliseeritud suuõõne, siis eristuvad suu limaskesta haigused.

Ekspressdiagnostika

Tänaseks on välja töötatud isegi kiirtestid, tänu millele saab HIV-nakkuse olemasolu kindlaks teha 15 minutiga. Neid on mitu liigid:

• Kõige täpsem test on immunokromatograafiline. Test koosneb spetsiaalsetest ribadest, millele kantakse kapillaarveri, uriin või sülg. Kui tuvastatakse HIV-vastased antikehad, on ribal värviline joon ja kontrolljoon. Kui vastus on eitav, on märgatav ainult joon.
• Komplektid koduseks kasutamiseks"OraSure Technologies1". Arendaja – Ameerika. Selle testi kiitis heaks FDA.
• Kiirteste on ka teisi, kuid neil puudub spetsialistide heakskiit ja seetõttu ei soovitata neid testida.

Kui paljastatakse positiivne reaktsioon inimese immuunpuudulikkuse viiruse puhul on vaja lisaks läbi viia asjakohane uuring kliinilises keskkonnas.

Varajane diagnoosimine

HIV-i varajane diagnoosimine on olemas selleks, et kiiresti kindlaks teha immuunkahjustuse oht. Tänu sellele peatatakse haigus algstaadiumis, mille tulemuseks on teiste nakatumine siseorganid vähendatakse miinimumini.

Patoloogia iseseisvaks diagnoosimiseks varajased staadiumid, pöörake tähelepanu olemasolevatele sümptomitele:

Polümeraasi ahelreaktsioon

Mis tahes määramiseks kasutatakse PCR-i või polümeraasi ahelreaktsiooni nakkustekitaja, sealhulgas HIV-viirus. Sel juhul tuvastatakse selle RNA ja patogeeni saab tuvastada väga varajases staadiumis (nakatusest peab mööduma vähemalt 10 päeva).

See on üsna kallis diagnoos, kuid mõnel juhul võib see anda vale tulemuse. Seetõttu kasutatakse HIV-i testimisel lisaks muid meetodeid.

Polümeraasi ahelreaktsiooni kvantitatiivne ekspressioon on vajalik HIV-i ja tüsistuste, näiteks AIDSi, arengukiiruse määramiseks. See võimaldab õigeaegselt määrata HIV-nakkusega patsiendi eeldatava eluea prognoosi.

Immuunbloteerimine

Immuunblotanalüüs on viimane meetod patsiendi uurimiseks täpne positsioneerimine diagnoos. Tehnika põhineb viirusvalkudega spetsiaalse riba (nitrotselluloosi) kasutamisel. Arst kogub veeniverd ja saadab seejärel töötlemiseks. Pärast seda protsessi eraldatakse vadakuvalgud molekulmassi ja laengu alusel geelitaoliseks aineks. Selleks kasutatakse aktiivse elektriväljaga seadmeid. Siis sisse see geelÜlaltoodud riba asetatakse ja blotitakse, st blotitakse. Seda tehakse spetsiaalses kambris.

Tulemuse määrab verevalkude seondumine nitrotselluloosribale kantud valkudega. Kui patsiendi kehas on HIV, ilmuvad üksikud jooned. HIV-i olemasolust märku andvate joonte tuvastamiseks on olemas teatud näitajad. Kuid on ka alahinnatud arve. Sel juhul on oht areneda esialgne etapp inimese immuunpuudulikkuse viirus, haridus onkoloogilised kasvajad, tuberkuloos, vereülekanne.

ELISA test

ELISA test on HIV-nakkuse kahtluse skriinimismeetod. Uuring viiakse läbi laboritingimustes. Seal luuakse spetsiifilised haigusvalgud, mis suudavad kinni püüda nende poolt toodetud valke Inimkeha. Reaktiividega suhtlemisel indikaatori värvus muutub. Seega ei tuvastata patogeeni ennast, vaid viirusevastaseid antikehi. See test suudab tuvastada inimese immuunpuudulikkuse viirust varases arengujärgus.

ELISA teste on mitut tüüpi, kuid kasutatakse ainult uusimaid arendusi – 3. ja 4. põlvkond. Tehnika põhineb veenist verevedeliku kogumisel. On teatud ettevalmistus - patsient ei tohi süüa 8 tundi enne analüüsi. Seetõttu kogutakse verd hommikul tühja kõhuga.

Kuidas toimub diagnoosimine inkubatsiooniperioodil?

HIV-viiruse inkubatsiooniperiood on 90 päeva. Sel perioodil on patoloogia esinemist raske tuvastada, kuid seda saab teha PCR-i abil.

Pärast seda on inimene aasta aega arstide tähelepanu all ja läbib mitmeid uuringuid. Alles pärast seda perioodi saab HIV-i diagnoosi kindlalt kindlaks teha.

Laste diagnoosimise tunnused

Kui laps sünnib naisele, kellel on diagnoositud inimese immuunpuudulikkuse viirus, uuritakse last esimese 3 eluaasta jooksul. Fakt on see, et sel perioodil võivad lapse verevedelikus olla ema antikehad. Kuid isegi vereanalüüsid ei kinnita nakatumist. Muidugi on palju juhtumeid, kus haigus avastatakse kohe pärast sündi. Lisateave HIV-nakkusega raseduse kohta.

Esimesed HIV-testid tehakse lapselt teisel päeval pärast sündi. Seejärel pärast 2 kuu vanuseks saamist, seejärel iga 4 kuu järel.

Patoloogia tuvastamiseks lapsepõlves Kasutatakse seroloogilisi uurimismeetodeid ja PCR-i. Just viimast tüüpi haiguse diagnoosimine võimaldab tuvastada viiruse DNA ja RNA imiku esimestel elukuudel. Selleks kogutakse beebi veri, mis seejärel asetatakse säilitusainet EDTA-d sisaldavasse katseklaasi. Seejärel hoitakse materjali 2 päeva temperatuuril, mis ei ületa 8 kraadi. Kuid verd ei ole lubatud külmutada. Kasutada võib ka kuivatatud verevedelikku, mis saadakse täisverest ja kuivatatakse.

Diagnostika etapid

Diagnostilised meetmed inimese immuunpuudulikkuse viiruse tuvastamiseks viiakse läbi kolmes põhietapis:

• Eelsorteerimine, tuntud ka kui sõelumine.
• Võrdlusdiagnostika.
• Kinnitav etapp või ekspertdiagnoos.

Sõelumine – eelsorteerimine

Uuringu esialgne etapp võimaldab teil määrata antikehade koguhulka, kasutades ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi, see tähendab ELISA-d. Teavet viiruse esinemise kohta saate juba 3 kuud pärast nakatumist. Kuid on olnud juhtumeid, kus patogeeni tuvastati varasemates staadiumides - 3 nädala pärast.

Peate teadma, et ELISA võib teatud tingimustel anda valepositiivse tulemuse. See võib juhtuda raseduse ajal, kui autoimmuunhaigused(psoriaas, reuma, luupus jne), Epstein-Bari tõbi ja muud patoloogiad.

Viitediagnostika

Selles etapis kasutatakse erinevaid teste vähemalt kaks korda, maksimaalselt kolm korda. Kui kahel juhul on tulemus positiivne, on vajalik kinnitusetapp.

Kinnitamise etapp – ekspert

Selles etapis tehakse diagnoos immunoblotanalüüsi abil. Antikehad määratakse vastavalt patogeeni teatud valkudele. Tavaliselt on tulemus täpne, kuid on ka valepositiivseid juhtumeid. See on võimalik AIDSi arengu lõppstaadiumis ja HIV-haiguse tuulevaikuse ajal. Seetõttu on oluline teatud aja möödudes protseduur täiendavalt läbi viia.

Vead diagnostika ajal

Nii paradoksaalne kui see ka ei tundu, on võimalus saada valepositiivne tulemus. Tavaliselt juhtub see kodus testimisel, eriti kiirtestide kasutamisel. Kliinilises keskkonnas on see võimalik ainult teatud haiguste või seisundite korral:

• raseduse periood;
• keha ristreaktsioon;
• autoimmuunsed patoloogilised häired;
• külmetushaigused ägedas staadiumis;
• onkoloogilised kasvajad;
• tuberkuloos;
• skleroos.

Omapära on see, et kui inimene on nakatunud viirustesse ja seentesse, siis võib ka testi tulemus olla vale. See kehtib eriti allergiliste seisundite kohta.

Katseteks valmistumine

Väga oluline on järgida HIV-testideks ettevalmistamise reegleid, sest sellest sõltub tulemuse täpsus:

• Kõigepealt peate külastama vastavat spetsialisti, et ta saaks teile täpsed juhised ettevalmistustoimingute kohta.
• Vereanalüüsid võetakse alati tühja kõhuga. Seetõttu ei tohiks enne kliinikusse minekut midagi süüa. Teie viimane söögikord peaks olema hiljemalt kell 21.00.
• Suitsetamine on testimise päeval keelatud.
• Ei tohiks eelmisel õhtul alkoholi juua.
• Kui te võtate mingeid ravimeid, konsulteerige kindlasti eelnevalt oma arstiga. Kuna enne HIV-testi tegemist on paljude ravimite kasutamine keelatud.
• Paar päeva enne analüüsi kogumist ei ole soovitatav teha ultraheliuuringut.
• Päev või paar enne protseduuri ei tasu süüa liigselt rasvaseid toite ega tarbida palju magusat.

HIV-nakkuse diagnoosimine (video)

Saate rohkem teada saada erinevaid meetodeid HIV-diagnoos kvalifitseeritud spetsialistide poolt. Selleks peaksite vaatama järgmist videot.